Post by awakening on Aug 2, 2023 0:29:22 GMT -5
酰基带电 3'-氨基酰基将其转化为 3'-OH。所有 RNA 样品经过预处理后，使用 NEBNext 进行 tsRNA 测序的文库制备。文库制备程序包括：（a）连接5'-接头，（b）连接3'-接头，（c）合成cDNA，（d）PCR扩增序列，（e）PCR选择134-160 bp扩增产物，这是扩增前的原始14-40 nt tsRNA。使用Agilent 2100生物分析仪准确X度和质量，以对完成的文
库进行定量。参考定量结果，将文库等量混合。使用相亚洲手机号码列表应的仪器对混合物进行测序。文库充分混合后，用0.1 M NaOH使文库中的DNA片段变性，从而形成单链DNA（ssDNA）分子。将上述 1.8 pM ssDNA 分子加载到试剂盒上。NextSeq 系统 (Illumina NextSeq 500) 用于按照制造商指南使用 NextSeq 500/550 V2 试剂盒 (Illumina, #FC-404-2005) 分析测
序样品。对于测序，进行了 50 个循环。Aksomics Corporation 按照他们的协议进行了这项实验。使用 1 M NaOH 使文库中的 DNA 片段变性，从而形成单链 DNA (ssDNA) 分子。将上述 1.8 pM ssDNA 分子加载到试剂盒上。NextSeq 系统 (Illumina NextSeq 500) 用于按照制造商指南使用 NextSeq 500/550 V2 试剂